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      抗乳鐵蛋白單克隆抗體的特異性是什么?

       更新時(shí)間:2020-10-27    點(diǎn)擊量:896
         抗體是一種由漿細(xì)胞(效應(yīng)B細(xì)胞)分泌,被免疫系統(tǒng)用來(lái)鑒別與中和外來(lái)物質(zhì)如細(xì)菌、病毒等的大型Y形蛋白質(zhì),僅被發(fā)現(xiàn)存在于脊椎動(dòng)物的血液等體液中,及其B細(xì)胞的細(xì)胞膜表面。
        乳鐵蛋白是乳汁中一種重要的非血紅素鐵結(jié)合糖蛋白,中性粒細(xì)胞顆粒中具有殺菌活性的單體糖蛋白。主要由乳腺上皮細(xì)胞表達(dá)和分泌。
        抗乳鐵蛋白單克隆抗體對(duì)由第1單克隆抗體和第二單克隆抗體組成,所述第1單克隆抗體由保藏的雜交瘤細(xì)胞株分泌得到,所述第二單克隆抗體由保藏的雜交瘤細(xì)胞株分泌得到。本發(fā)明還提供了如上所述的人乳鐵蛋白單克隆抗體對(duì)在制備檢測(cè)人乳鐵蛋白的試劑盒中的用途。通過(guò)上述技術(shù)方案,本發(fā)明能夠通過(guò)雙抗夾心免疫試紙檢測(cè)方法,對(duì)人乳鐵蛋白的檢測(cè)取得的靈敏度,對(duì)牛乳鐵蛋白和羊乳鐵蛋白不呈現(xiàn)交叉反應(yīng),并且對(duì)人溶菌酶轉(zhuǎn)基因牛、人α?乳清白蛋白轉(zhuǎn)基因牛不呈現(xiàn)交叉反應(yīng),具有較高的敏感度和特異性。
        抗乳鐵蛋白單克隆抗體的特異性:抗乳鐵蛋白單克隆抗體和人轉(zhuǎn)鐵蛋白沒(méi)有交叉反應(yīng),但是單克隆抗體和人轉(zhuǎn)鐵蛋白交叉反應(yīng)微弱。
        單克隆抗體制備的基本過(guò)程如下:
        (1)用抗原免疫小鼠;
        (2)從抗原免疫過(guò)的小鼠獲取脾細(xì)胞;
        (3)應(yīng)用細(xì)胞雜交技術(shù)使骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合,得到雜交瘤細(xì)胞。這種細(xì)胞不僅能夠像B淋巴細(xì)胞一樣合成性質(zhì)穩(wěn)定的轉(zhuǎn)移性抗體,而且能夠像骨髓瘤細(xì)胞一樣無(wú)限復(fù)制,這樣就可以產(chǎn)生大量且性質(zhì)專(zhuān)一的鼠源抗體;
        (4)對(duì)獲得的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行篩選,選出能分泌高效價(jià)抗體的雜交瘤;
        (5)對(duì)已篩選出的單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行鑒定和克隆。
        雜交瘤產(chǎn)生的單克隆抗體在各個(gè)領(lǐng)域中應(yīng)用越來(lái)越廣,有很大的優(yōu)點(diǎn)和潛力。能夠根據(jù)需要進(jìn)行研發(fā)生產(chǎn),可建立穩(wěn)定的細(xì)胞株持續(xù)供給應(yīng)用,相比于抗血清能夠減少大量的動(dòng)物和費(fèi)用,而且純度高,均一性好,可作為一種標(biāo)準(zhǔn)試劑。
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