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      玉米赤霉烯酮免疫親和柱的樣本處理步驟分析

       更新時(shí)間:2023-03-13    點(diǎn)擊量:747
        玉米赤霉烯酮免疫親和柱是玉米赤霉菌的代謝產(chǎn)物,具有類(lèi)雌激素樣作用,具有較強(qiáng)的生殖毒性和致畸作用,可引起動(dòng)物發(fā)生雌激素亢進(jìn)癥,導(dǎo)致動(dòng)物不孕或流產(chǎn),對(duì)家禽、豬、牛和羊的影響較大,給畜牧業(yè)帶來(lái)很大的經(jīng)濟(jì)損失。
       
        玉米赤霉烯酮免疫親和柱的樣本處理步驟:
       
        花生,玉米,大米,小麥及其制品和飼料
       
        1、稱(chēng)取50g粉碎的樣品于100mL容量瓶中,加入5.0g氯化鈉,以樣品提取液定容;
       
        2、轉(zhuǎn)移至均質(zhì)杯中,在均質(zhì)器上高速攪拌,提取2分鐘;
       
        3、4000r/min離心5min或用定量濾紙過(guò)濾
       
        4、取10mL濾液并加入40mLPBS緩沖液稀釋?zhuān)貌A⒗w維濾紙過(guò)濾,取過(guò)濾后液體待測(cè);
       
        5、將免疫親和柱連接于10.0mL玻璃注射器下。準(zhǔn)確移取10.0mL樣品提取液注入玻璃注射器;
       
        6、將空氣壓力泵與玻璃注射器連接,調(diào)節(jié)壓力使溶液以約1滴/S的流速緩慢通過(guò)免疫親和柱,直至2~3mL空氣通過(guò)柱體;
       
        7、以10.0mL的PBS溶液和去離子水依次淋洗柱子1次,流速約為1滴-2滴/S,棄去全部流出液,并使2mL~3mL空氣通過(guò)柱體;
       
        8、準(zhǔn)確加入1.0mL色譜級(jí)甲醇洗脫,流速為1滴/S,收集全部洗脫液于玻璃試管中,供檢測(cè)用。
       
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