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      禽白血病病毒抗原ELISA批量凈化檢測試劑盒

      簡要描述:禽白血病病毒抗原ELISA批量凈化檢測試劑盒用途
      批量檢測蛋清、泄殖腔式子、肝臟、病毒培養(yǎng)液等一批中禽白血病病毒,檢測結(jié)果可用于ALV感染的輔助診斷。

      • 產(chǎn)品型號:
      • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
      • 更新時間:2022-04-07
      • 訪  問  量:836
      詳情介紹

      一、禽白血病病毒抗原ELISA批量凈化檢測試劑盒原理

      本試劑盒采用直接競爭ELISA方法批量檢測禽白血病病毒抗原

      二、用途

      批量檢測蛋清、泄殖腔式子、肝臟、病毒培養(yǎng)液等一批中禽白血病病毒,檢測結(jié)果可用于ALV感染的輔助診斷。

      三、禽白血病病毒抗原ELISA批量凈化檢測試劑盒所需材料

      儀器微孔板酶標儀450 nm/630 nm振蕩器、離心機、、離心管(5 mL, 50 mL

      微量移液器:單道 1µL10 µL、10 µL100µL

      多道 50µL300µL

      試劑:去離子水

      五、 試劑盒組成

      序號

      組成部分

      96T裝量

      1

      陽性對照酶標板

      961-5

      2

      陽性對照

      2mL

      3

      酶標物

      13 mL

      4

      底物A

      7 mL

      5

      底物B

      7 mL

      6

      終 止 液

      7 mL

      7

      20×濃縮洗滌液

      40 mL

      8

      2×樣品稀釋液

      40 mL

      六、溶液配制

      配液1: 洗滌工作液

        用去離子水將20×濃縮洗滌液按1 : 19體積比進行稀釋,用于酶標板的洗滌,洗滌工作液在4℃環(huán)境可保存一個月,用前一天取出回溫。

      配液2: 1 ×樣品稀釋液      

        用去離子水將2 ×樣品稀釋液按1:1體積比進行稀釋配好1 ×樣品稀釋液4℃環(huán)境可保存一個月,用前一天取出回溫。

      七、樣本前處理                                                  

      樣本處理前須知:

      ① 處理完的樣品應及時進行下步檢測,實驗中必須使用一次性吸頭,吸取不同試劑時要更換吸頭。

      ② 樣本數(shù)目超過8個時推薦使用排槍加樣。

      樣本處理:

      蛋清取全蛋,破碎后取蛋清,,-20℃以下凍融1次,用微量移液器吸取蛋清直接進行檢測。

      泄殖腔拭子用無菌棉簽于待檢雞只泄殖腔取樣后,放入0.5ml 1×樣品稀釋液中,置-20℃以下凍融1次,劇烈震蕩1分鐘,擠出棉簽中的液體,棄棉簽。以5000r/min離心5分鐘,取上清直接進行檢測。

      病毒培養(yǎng)液,取病毒培養(yǎng)液以8000r/min離心10分鐘,取上清直接進行檢測。

      ④肝臟等組織,取約2g加入0.5ml 1×樣品稀釋液,研磨破碎,置-20℃以下凍融1次,以5000r/min離心5分鐘,取上清直接進行檢測。

      、 酶標免疫測定程序

      ①將所有所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,待其*回升至室溫(20~25)后方可使用。注意每種液體試劑使用前均須搖勻。

      ② 按陽性對照和樣品雙孔平行的數(shù)量使用微孔。


      包被板上對照品和待測樣品添加如下所示:


      1

      2

      3

      4

      5

      6

      7

      8

      9

      10

      11

      12

      A

      N

      S1

      S2

      S3

      S4








      B

      N












      C

      P












      D

      P












      E













      F













      G













      H













      (注:P表示陽性對照品;N表示陰性對照品;S1、S2、S3、S4等表示待檢樣品)


      ③加入處理好的待檢樣品,100µL/孔,同時設(shè)陰、陽性對照品(各2),輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置37避光環(huán)境中反應30min

      ④洗板:小心揭開蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,加入洗滌工作液300 µL/孔,每次靜置20s,甩去孔內(nèi)液體,重復洗滌3次,最后一次用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破)。

      ⑤加酶標物:加入酶標物100 µL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置37避光孵育30 min。

      .甩干孔內(nèi)液體,重復洗板3次,最后一次用吸水紙拍干。

      ⑦顯色:加入底物液A50 µL/孔,再加底物液B50 µL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置37避光環(huán)境中反應10min。

      測定:加入終止液50µL/孔,用酶標儀立即  測定450nm處的吸光度值。

      九、 結(jié)果判定

      試驗結(jié)果滿足有效的前提條件是:陽性對照品孔的平均OD450nm>0.20,陰性對照品孔的平均OD450nm<0.10。

      S/P=   檢測樣品平均OD450nm/ 陽性對照品孔的平均OD450nm

      S/P 0.2時,判定為陽性樣品,數(shù)值越大,陽性越強;檢測樣品0.1 S/P <0.2時,判定為可疑樣品,建議一周后重測; 檢測樣品OD450nm<0.1時為陰性樣品。

      、 注意事項

      本品僅供體外檢測使用。

      樣本前處理完畢后以及洗板拍干后應立即進行下一步操作。

      反應終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚。

      不使用過了有效期的試劑盒,不交換使用不同批號的試劑。試劑盒中的各種液體試劑使用前應充分搖勻,平衡至室溫。

      ⑤包被板拆封后未使用,應放回鋁箔袋并封口,28保存,應避免受潮,試劑盒使用完畢后應在28下保存。

      應嚴格按照試劑盒說明書進行操作,嚴格遵循各操作步驟規(guī)定的時間和溫度。

      未提及問題請致電本公司技術(shù)服務部。

      十一、貯藏條件及保存期

         貯藏條件: 28

      保 質(zhì) 期: 6個月


      僅供獸醫(yī)診斷使用

      長期提供原核、真核蛋白表達構(gòu)建服務

      長期 提供抗原偶聯(lián)、 HRP、生物素、糖基化、親和素、FITC等偶聯(lián)標記多肽、抗體、抗原、蛋白等服務


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