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      血液RNA核酸免提取試劑盒

      簡(jiǎn)要描述:血液RNA核酸免提取試劑盒

      試劑盒應(yīng)用
      本試劑盒采用特殊裂解液B從新鮮全血、抗凝血、血凝塊中提取并純化RNA。整個(gè)過(guò)程僅需要10分鐘。采用硅基材質(zhì)吸附柱,高效專一吸附RNA,保證提取高純度、高產(chǎn)量RNA。該裂解液配方中含有RNA保護(hù)劑,能夠抑制RNA降解、保護(hù)RNA完整,從而提高RNA產(chǎn)量。提取RNA可用于RT-PCR、RT-qPCR、Northern Blot、分子克隆、文庫(kù)構(gòu)建等。

      • 產(chǎn)品型號(hào):
      • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
      • 更新時(shí)間:2023-04-27
      • 訪  問(wèn)  量:677
      詳情介紹

      血液RNA核酸免提取試劑盒

       

      試劑盒應(yīng)用

      本試劑盒采用特殊裂解液B從新鮮全血、抗凝血、血凝塊中提取并純化RNA整個(gè)過(guò)程僅需要10分鐘。采用硅基材質(zhì)吸附柱,高效專一吸附RNA,保證提取高純度、高產(chǎn)量RNA。該裂解液配方中含有RNA保護(hù)劑,能夠抑制RNA降解、保護(hù)RNA完整,從而提高RNA產(chǎn)量。提取RNA可用于RT-PCR、RT-qPCRNorthern Blot、分子克隆、文庫(kù)構(gòu)建等。

      本試劑盒僅供研究使用,不可用于臨床、食品、化妝品等領(lǐng)域。

       

      試劑盒組成

      組分

      Col-R030150T

      編號(hào)

      裂解液B

      35 mL

      Col-R0301A

      洗滌液BW1

      25 mL

      Col-R0301B

      洗滌液BW2

      12 mL

      Col-R0301C

      洗脫液B

      5 mL


      RNA吸附柱

      50

      Col-R0301E

      備注:1、第一次使用前,在洗滌液BW2中加入48mL無(wú)水乙醇,并標(biāo)記"和時(shí)間,避免重復(fù)加入。

       

      保存條件

      室溫保存一年

       

      自備材料

      水浴鍋或金屬浴、無(wú)水乙醇、1.5mL無(wú)RNase離心管、蛋白酶K20mg/mL,或貨號(hào)QR0301)、DNase I2U/μL,或貨號(hào)QR0102

       

      使用方法

      1. 300μL血液(不足300μL,無(wú)菌PBS補(bǔ)齊)中加入500μL裂解液B10μL蛋白酶K,顛倒混勻。

      2. 55℃孵育2分鐘。

      備注:如果RNA提取量比較低,可延長(zhǎng)孵育時(shí)間到10分鐘。

      3. 12,000rpm離心30秒。取750μL上清。

      4. 加入0.5倍體積無(wú)水乙醇,上下顛倒混勻,

      5. 全部加入RNA吸附柱中,12,000rpm離心30秒,倒掉收集管中廢液。

      6. RNA吸附柱中加入500μL洗滌液BW112,000rpm離心30秒,倒掉收集管中廢液。

      7. RNA吸附柱中加入500μL洗滌液BW2,12,000rpm離心30秒,倒掉收集管中廢液。

      8. 重復(fù)步驟7一次。

      9. 12,000rpm離心2分鐘,倒掉收集管中廢液。

      10. RNA吸附柱放入新1.5mL無(wú)RNase離心管中,加入30-50μL洗脫液B,室溫放置1分鐘。

      11. 12,000rpm離心2分鐘,得到RNA溶液,-80℃保存。

       

      注意事項(xiàng)

      1. 務(wù)必在超凈臺(tái)中進(jìn)行操作,常換手套,防止RNA降解。

      2. 盡可能使用新鮮樣本進(jìn)行RNA提取。

      3. 使用無(wú)DNase無(wú)RNase的吸頭和離心管,防止RNA降解,常更換吸頭,防止交叉污染。

      4. 為了提高洗脫效率,可提前將洗脫液B置于65℃水浴后再使用。

      5. 根據(jù)后續(xù)試驗(yàn)需求,請(qǐng)使用DNase I(貨號(hào)QR0102)進(jìn)行基因組清除。

       

      常見問(wèn)題解析

      問(wèn)題

      可能原因

      推薦解決方案

      RNA吸附柱

      堵塞

      (1)上樣量太高

      (2)加入RNA吸附柱的液體中有固體成分或沉淀物

      (1)減少上樣量。

      (2)增加離心時(shí)間。

      (3)切勿吸取到可見固體成分。

      (4)再次離心。

      RNA得率低

      (1)未離心下來(lái)

      (2)樣本量太大,裂解不充分

      (1)減少樣本量。

      (2)重復(fù)洗脫步驟一次。

      RNA降解

      (1)樣本不新鮮

      (2)RNA酶污染

      (1)使用新鮮樣本。

      (2)使用保存在樣品保存液中樣本。

      (3)樣本保存在-80℃甚至液氮中,盡可能現(xiàn)取現(xiàn)用。

      (4)常更換手套。

      (5)常更換吸頭和離心管。

      (6)使用無(wú)DNase無(wú)RNase的吸頭和離心管。

       


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