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      RNA核酸免提取試劑盒

      簡要描述:RNA核酸免提取試劑盒

      試劑盒應用
      本試劑盒采用zhuan利裂解液配方,有針對性的從組織、培養(yǎng)細胞、拭子、血液、尿液、唾液、環(huán)境樣本中獲得病毒RNA。裂解、提取和純化只需10分鐘。該配方中添加RNA保護劑,能夠抑制RNA降解、保護RNA完整,從而提高RNA產(chǎn)量。提取后的RNA可直接用于RT-PCR、RT-qPCR、分子克隆、文庫構(gòu)建等實驗。

      • 產(chǎn)品型號:
      • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
      • 更新時間:2023-04-27
      • 訪  問  量:717
      詳情介紹

      RNA核酸免提取試劑盒

       

      試劑盒應用

      本試劑盒采用zhuan利裂解液配方,有針對性的從組織、培養(yǎng)細胞、拭子、血液、尿液、唾液、環(huán)境樣本中獲得病毒RNA。裂解、提取和純化只需10分鐘。該配方中添加RNA保護劑,能夠抑制RNA降解、保護RNA完整,從而提高RNA產(chǎn)量。提取后的RNA可直接用于RT-PCRRT-qPCR、分子克隆、文庫構(gòu)建實驗。

      本試劑盒僅供研究使用,不可用于臨床、食品、化妝品等領(lǐng)域。

       

      試劑盒組成

      組分

      Col-R050250T

      編號

      裂解液VR

      35 mL

      Col-R0502A

      洗滌液VRI

      25 mL

      Col-R0502B

      洗滌液VRII

      12 mL

      Col-R0502C

      洗脫液VR

      5 mL


      RNA吸附柱

      50

      Col-R0502E

      備注:第一次使用前,在洗滌液VRII中加入48mL無水乙醇,并標記"和時間,避免重復加入。

       

      保存條件

      室溫保存一年

       

      自備材料

      水浴鍋或金屬浴、無水乙醇、1.5mLRNase離心管

       

      使用方法

      1. 樣本處理方法

      1.1 從動物組織中提取

      1.1.1 20-100mg組織樣本放入液氮中充分研磨,加入700μL裂解液VR,顛倒混勻。

      或者20-100mg組織樣本加入700μL裂解液VR,加入1顆鋼珠,放入組織研磨器中,研磨1-2分鐘。

      1.1.2 55℃孵育1分鐘。12,000rpm離心1分鐘。

      1.1.3 500μL上清加入250μL無水乙醇,充分混勻。按照步驟2.1-2.7進行操作。

       

      1.2 從懸浮細胞中提取

      1.2.1 細胞1,000rpm離心5分鐘,收集細胞沉淀。

      1.2.2 細胞數(shù)量<5×106時,加入500μL裂解液DV。細胞數(shù)量為5×106~1×107時,加入700μL裂解液VR。輕輕吹打混勻,55℃孵育1分鐘。

      1.2.3 12,000rpm離心1分鐘。

      1.2.4 細胞數(shù)量<5×106時,450μL上清。細胞數(shù)量為5×106~1×107時,650μL上清。

      1.2.5 加入0.5倍體積無水乙醇,充分混勻。按照步驟2.1-2.7操作。

       

      1.3 從貼壁細胞中提取

      1.3.1 yimei消化細胞后1,000rpm離心5分鐘,收集細胞沉淀。

      1.3.2 細胞數(shù)量<5×106時,加入500μL裂解液DV。細胞數(shù)量為5×106~1×107時,加入700μL裂解液VR。輕輕吹打混勻,55℃孵育1分鐘。

      1.3.3 12,000rpm離心1分鐘。

      1.3.4 細胞數(shù)量<5×106時,450μL上清。細胞數(shù)量為5×106~1×107時,650μL上清。

      1.3.5 加入0.5倍體積無水乙醇,充分混勻。按照步驟2.1-2.7操作。

       

      1.4 從血液、尿液、唾液、細胞上清液中提取

      1.4.1 300μL樣本中加入500μL裂解液VR。顛倒混勻,55℃孵育1分鐘

      1.4.2 加入400μL無水乙醇,上下顛倒混勻。按照步驟2.1-2.7操作。

       

      1.5 從拭子中提取

      1.5.1 拭子置于700μL裂解液VR中,顛倒混勻,55℃孵育1分鐘。

      1.5.2 加入350μL無水乙醇,上下顛倒混勻。按照步驟2.1-2.7操作。

       

      2. 提取步驟

      2.1 1全部加入RNA吸附柱中(如有需要可離心兩次),12,000rpm離心1分鐘,倒掉收集管中廢液。

      2.2 RNA吸附柱中加入500μL洗滌液VRI,12,000rpm離心30秒,倒掉收集管中廢液。

      2.3 RNA吸附柱中加入500μL洗滌液VRII,12,000rpm離心30秒,倒掉收集管中廢液。

      2.4 重復步驟2.3一次。

      2.5 12,000rpm離心2分鐘,倒掉收集管中廢液。

      2.6 RNA吸附柱放入新1.5mLRNase離心管中,加入30-50μL洗脫液VR,室溫放置1分鐘。     

      2.7 12,000rpm離心2分鐘,得到RNA溶液,-80℃保存。

       

      注意事項

      1、務必在超凈臺中進行操作,常換手套,防止RNA降解。

      2、盡可能使用新鮮樣本進行RNA提取。

      3、使用無DNaseRNase的吸頭和離心管,防止RNA降解,常更換吸頭,防止交叉污染。

      4、為了提高洗脫效率,可提前將洗脫液VR置于65℃水浴后再使用。

       

       


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